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96T/48T人(MPO-ANCA IgG)kit,髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgGElisa試劑盒

人(MPO-ANCA IgG)kit,髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgGElisa試劑盒本試劑僅供研究使用 Elisa kit規格:48孔配置/96孔配置標準品稀釋液:1.5ml×1瓶酶標試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96) 

特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。有效期:6個月預期應用:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。

人(MPO-ANCA IgG)kit,髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgGElisa試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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該公司產品分類: 生化試劑 其他Elisa試劑盒 猴子Elisa試劑盒 兔子Elisa試劑盒 牛Elisa試劑盒 標準品,對照品 表面活性劑 抗生素類 碳水化合物類 緩沖劑類 維生素類 氨基酸 分離材料及耗材 酶類 蛋白質類 植物激素及核酸類 色素類 生物試劑 人Elisa試劑盒 大鼠Elisa試劑盒

人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒

 產品名稱:人腸脂肪酸結合蛋白(iFABPELISA試劑盒
產品規格:48T/96T
檢測方法: ELISA酶聯免疫法
  書:隨貨發送,也可直接聯系在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期:2-8,避光保存:6個月。
產品產地:進口/國產
產品庫存:
品牌:自主研發/進口原裝
產品價格:價格優惠,歡迎來電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
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人腸脂肪酸結合蛋白(iFABPELISA試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,正規專業的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們聯系,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優質服務進行到底。
供應商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA試劑盒獨特優勢:
1、采用全進口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴格引進國際技術標準進行批量生產。
2、先進的優化方案:重復性高,可靠性。
3、技術服務:專業,及時,耐心。
4、現貨供應:江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABPELISA試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABPELISA試劑盒操作步驟:
1、包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,37,4h,4,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發,板上應加蓋或將板平放在底部有濕紗布的金屬濕盒中)
2、封閉酶標反應孔:
5%小牛血清置37封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結束后用洗滌液滿孔洗滌3,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數3
3、加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度,應采用較大稀釋體積進行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標反應孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3,每遍3min.
4、加入酶標抗體:
酶標抗體:根據酶結合物提供商提供的參考工作稀釋度進行.37,30-60min之間.短于30min往往結果不穩定.每孔加100μl.洗滌同前.
5、加入底物液(現用現配):
首選TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統次之.
底物加入量:每孔100μl,37避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6、終止反應:
每孔加入終止液50μl終止反應,20min內測定實驗結果.
7、結果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應產物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進行空白孔系統調零.用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示,P/N大于2時作為抗體的效價.(數值的大小依具體檢測要求而定.)
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABPELISA試劑盒經過嚴格交叉反應和干擾測試及穩定性試驗;明確的敏感度;針對所有樣品類型達到的性能;廣泛的檢測范圍可以滿足大多數檢測要求;完善的售后服務和免費的技術支持免去您的后顧之憂,凡購買試劑盒者都可享受我公司相應折扣優惠,如有需要,可來電咨詢購買!
關于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優質的診斷試劑離不開優質的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。酶表抗體為與HBsAg有不同結合位點的鼠復合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEIHBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/mlay標準品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
LISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
特點:一、高效、靈敏、特異的抗體;  二、穩定的重復性和可靠性;  三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;  四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;  五、節省實驗經費。
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
安全性
1 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
5 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
6 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
elisa試劑盒測試要求
做好對照
正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實驗條件的選擇
ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
2 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4 1824小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.010μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為110μg/ml
3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取方陣法(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數R≥0.98
試劑盒重復性好,板內、板間變異系數均<9 %
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大
 
 
 
 
 
該公司產品分類: 細胞 血清 羊ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 猴ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 艾本德移液器

兔白細胞介素15 ELISA試劑盒價格,現貨兔IL-15試劑盒開學特價

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【Elisa試劑盒供應的種屬】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物elisa試劑盒等
【Elisa試劑盒檢測目的】用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本
 
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人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA試劑盒

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  閎巨生物ELISA酶聯免疫分析試劑盒生產廠家部分合作單位:中科院﹑醫科院﹑農科院等科研院所﹑北京大學,復旦大學、解放軍總醫院,黑龍江省醫院,第一軍醫大學、安徽省農科院、浙江大學等大學院校的重點實驗室選用。

  L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA試劑盒 產品資料:

  【產品名稱】:人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA試劑盒

  【產品用途】:被測樣品定性定量分析

  【產品規格】:96T/48T(兩種規格)

  【檢測方法】:酶免法/酶聯免疫法(ELISA)

  【保存條件】:2-8

  【供 期】:1-3(現貨供應)

  【產品性狀】:液體盒裝

  【產品價格】:含稅含運費,我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測

  【銷售優勢】:價格行業優勢、質量可靠、如果出現客觀質量問題包換退

  【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

【保 期】:半年(六個月)

  人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA試劑盒 應用領域:

  ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。

  因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:

  1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。

  2、研究抗酶抗體的合成。

  3、顯現微量的免疫沉淀反應。

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

  人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA試劑盒 產品優勢:

  1)人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3ELISA試劑盒能夠對天然蛋白進行檢測,更接近信號傳遞相關蛋白天然構象,結果更加真實。

  2)可信能夠進行定量或半定量檢測,將Western blot的將條帶形式轉化為可以量化的吸收值,客戶可以通過數據可以進行有效的統計學分析。

  3)便于大量樣本篩查,在96孔板內進行分析,便于數據的規模化讀取和分析,非常適合客戶進行高通量分析。

  4)具有不同通量的產品線,可以滿足不同通量要求的信號通路蛋白分析,客戶可以利用此產品線獲得大量數據。

  5)靈敏度高,客戶可以對微小的蛋白修飾變化進行精細分析。

  6)檢測范圍廣,客戶能夠有效對不同豐度和修飾狀態的蛋白進行廣泛分析。

  7)試劑盒設計合理,每一套產品,我們都精心設計了實驗,將所有實驗所需的溶液和耗材標準化,節省客戶的時間和精力,得到最為標準可信的數據。

  8)實驗可重復性高,該產品線所得數據可信,便于設立復孔,質量控制更加嚴密,可重復性和穩定性較高。

  閎巨生物ELISA酶聯免疫分析試劑盒生產廠家對試劑的質量保證與免責聲明:

  1、我們保證向用戶提供完全合格的產品。如您認為產品確實存在質量問題,請在收到產品21天內并且產品使用量沒有超過一半前以書面方式提出,否則將不予受理或賠償。同時產品賠償只限于產品價值本身,不涉及其他任何損失。我們承諾隨時為您提供專業的技術指導。

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  ELISA酶聯免疫分析試劑盒生產廠家訂購流程:

  1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。

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  閎巨生物ELISA酶聯免疫分析試劑盒生產廠家是中國ELISA檢測試劑盒的專業的銷售平臺和貿易中心,公司的ELISA檢測試劑盒現全部實行“特價優惠”,望新老客戶前來購買。

該公司產品分類: 人elisa試劑盒 魚elisa試劑盒 小鼠elisa試劑盒 大鼠elisa試劑盒 牛elisa試劑盒 雞elisa試劑盒 豬elisa試劑盒 羊elisa試劑盒 豚鼠elisa試劑盒 兔子elisa試劑盒 倉鼠elisa試劑盒 植物elisa試劑盒 其他elisa試劑盒 elisa試劑盒

96T/48T人抗乙肝病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)ELISA試劑盒,HBcAb-IgG

人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)elisa試劑盒主要用于科研方面,不用于臨床診斷?梢杂糜跈z測各種指標。  試劑盒主要分為以下系列:1.細胞因子檢測試劑盒 2.內分泌檢測試劑盒 3.肝纖維化檢測試劑盒 4.心肌梗塞檢測試劑盒 5.腫瘤標志物檢測試劑盒 6.自身免疫檢測試劑盒 7.優生優育檢測試劑盒 8.傳染病檢測試劑盒 等等;各種種屬有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;植物。標本齊全:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等等;人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)elisa試劑盒組成及試劑配制 1.        酶聯板:一塊(96孔) 2.        標準品(凍干品)  3.        樣品稀釋液:1×20ml。4.        檢測稀釋液A:1×10ml。5.        檢測稀釋液B:1×10ml。6.        檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。7.        檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。8.        底物溶液:1×10ml/瓶。 9.        濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10.    終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11.    覆膜:5張12.    使用說明書:1份 自備物品 1.   酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱) 2.   微量加液器及吸頭,EP管3.   蒸餾水或去離子水,全新濾紙 人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)elisa試劑盒標本的采集及保存 1.        血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.        血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.        其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。4.        樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋5,000倍。注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。 注:1.  試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,第一個孔與最后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)最好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。3.   孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響最后的酶標儀讀數。5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請精確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。    建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。    如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數。 洗板方法1.  手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。2.  自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算  以標準物的濃度為縱坐標(對數坐標),OD值為橫坐標(對數坐標),在對數坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。   ◇      注意事項:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。 ◇      液體類標本標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。 ◇      血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。 ◇      血漿:應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。 ◇      尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。 ◇      細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 ◇      組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

 

人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA Kit ELISA. 96T人白介素2受體(IL-2R)ELISA Kit ELISA. 96T人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA KitELISA. 96T人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA KitELISA. 96T人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA Kit ELISA. 96T人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA KitELISA. 96T人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit ELISA. 96T人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA KitELISA. 96T人ω干擾素(IFN-ω)ELISA Kit ELISA. 96T人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA Kit ELISA. 96T人干擾素調節因子(IRF)ELISA Kit ELISA. 96T人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit ELISA. 96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA Kit ELISA. 96T人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA KitELISA. 96T人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA KitELISA. 96T人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit ELISA. 96T人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA KitELISA. 96T人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD38(sCD38)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA KitELISA. 96T人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA kitELISA. 96T人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA Kit ELISA. 96T人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit ELISA. 96T人白三烯D4(LTD4)ELISA KitELISA. 96T人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA Kit ELISA. 96T人肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA Kit ELISA. 96T人紅細胞刺激因子(ESF)ELISA Kit ELISA. 96T人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA Kit ELISA. 96T人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA Kit ELISA. 96T人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA Kit ELISA. 96T人B細胞生長因子(BCGF)ELISA Kit ELISA. 96T人B細胞分化因子(BCDF)ELISA Kit ELISA. 96T人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性粘附分子(Sam)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA KitELISA. 96T人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA KitELISA. 96T人胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA KitELISA. 96T人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA KitELISA. 96T人多效生長因子(PTN)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD28(sCD28)ELISA KitELISA. 96T人淋巴細胞因子ELISA KitELISA. 96T人胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA Kit ELISA. 96T人神經細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA Kit ELISA. 96T人神經保護因子(CVNPF)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA KitELISA. 96T人可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA KitELISA. 96T人可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)ELISA KitELISA. 96T人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA KitELISA. 96T人集落刺激因子(CSF)ELISA KitELISA. 96T人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA KitELISA. 96T人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA KitELISA. 96T人CD14分子(CDl4)ELISA KitELISA. 96T人凋亡誘導因子(AIF)ELISA KitELISA. 96T人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA KitELISA. 96T人CD4分子(CD4)ELISA KitELISA. 96T人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA Kit ELISA. 96T人角化細胞生長因子(KGF)ELISA KitELISA. 96T人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA KitELISA. 96T人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA KitELISA. 96T人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA KitELISA. 96T人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA KitELISA. 96T人基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA KitELISA. 96T人淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA KitELISA. 96T人α干擾素(IFN-α)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA KitELISA. 96T人白介素27(IL-27)ELISA KitELISA. 96T人白介素23(IL-23)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA KitELISA. 96T人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA KitELISA. 96T人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA KitELISA. 96T人白介素1(IL-1)ELISA KitELISA. 96T人白介素17(IL-17)ELISA KitELISA. 96T人白介素1β (IL-1β)ELISA KitELISA. 96T人表皮生長因子(EGF)ELISA KitELISA. 96T人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA KitELISA. 96T人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA KitELISA. 96T人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA KitELISA. 96T人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA KitELISA. 96T人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA KitELISA. 96T人結締組織生長因子(CTGF)ELISA KitELISA. 96T人白介素18(IL-18)ELISA KitELISA. 96T人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit ELISA. 96T人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit ELISA. 96T人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA Kit ELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA KitELISA. 96T人血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA Kit ELISA. 96T人血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA kit ELISA. 96T人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA KIT ELISA. 96T人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA KitELISA. 96T人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA KitELISA. 96T人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA KitELISA. 96T人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA KitELISA. 96T人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA KIT ELISA. 96T人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA KitELISA. 96T人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA KitELISA. 96T人轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA kitELISA. 96T人轉化生長因子α(TGF-α)ELISA KitELISA. 96T人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA kit *ELISA. 96T人干細胞因子受體(SCFR)ELISA Kit *ELISA. 96T人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA Kit *ELISA. 96T人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA Kit *ELISA. 96T人可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA Kit *ELISA. 96T人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit ELISA. 96T人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA KitELISA. 96T人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA KitELISA. 96T人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA KitELISA. 96T人神經營養因子4(NT-4)ELISA KitELISA. 96T人神經營養因子3(NT-3)ELISA KitELISA. 96T人的神經生長因子(NGF)ELISA kit ELISA. 96T人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA kit ELISA. 96T人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA KitELISA. 96T人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA KitELISA. 96T人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA KitELISA. 96T人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA KitELISA. 96T人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA KitELISA. 96T人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA KitELISA. 96T人白介素9(IL-9)ELISA KitELISA. 96T人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KIT ELISA. 96T人白介素6(IL-6)ELISA KIT ELISA. 96T人白介素-5(IL-5)ELISA KitELISA. 96T人白介素4(IL-4)ELISA KitELISA. 96T人白介素3(IL-3)ELISA KitELISA. 96T人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA KitELISA. 96T人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA KitELISA. 96T人白介素2(IL-2)ELISA kit ELISA. 96T人白介素1α(IL-1α )ELISA KitELISA. 96T人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA KitELISA. 96T人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA KitELISA. 96T人白介素16(IL-16)ELISA KitELISA. 96T人白介素13(IL-13)ELISA KitELISA. 96T人白介素12(IL-12/P70)ELISA KitELISA. 96T人白介素12(IL-12/P40)ELISA KitELISA. 96T人白介素11(IL-11)ELISA KitELISA. 96T人白介素10(IL-10)ELISA KIT ELISA. 96T人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA KitELISA. 96T人胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA KitELISA. 96T人胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)ELISA KitELISA. 96T人胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA KitELISA. 96T人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA KitELISA. 96T人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit ELISA. 96T人γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit ELISA. 96T人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT ELISA. 96T人肝細胞生長因子(HGF)ELISA kit ELISA. 96T人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA KitELISA. 96T人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA KitELISA. 96T人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA KitELISA. 96T人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA KitELISA. 96T人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA KitELISA. 96T人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA KitELISA. 96T人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA KitELISA. 96T人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA KitELISA. 96T人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA KitELISA. 96T人凋亡相關因子配體(FASL)ELISA KitELISA. 96T人凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA KitELISA. 96T人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit ELISA. 96T

該公司產品分類: elisa ELISA試劑盒 醫療器械 移液器 分子生物學相關試劑 生化試劑 化學試劑 實驗耗材

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒

植物維生素D(VD)elisa試劑盒

Plant Vitamin D,VD ELISA Kit

96孔酶標包被板

48孔酶標包被板

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒 種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。【免費代測】

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒

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Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit

人elisa試劑盒常年優惠,人狼瘡抗凝抗體ELISA試劑盒,(LAC/LA)Elisa試劑盒

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兔子elisa試劑盒,兔子基質金屬蛋白酶9ELISA試劑盒,(MMP-9)Elisa試劑盒

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人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒 

Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA Kit

大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒

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GSK kit,人(GSK)Elisa試劑盒

PoFAine Interferon α,IFN-α ELISA Kit 

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒  

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。

 2.批內與批見應分別小于9%11%

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒  全國廠家直接銷售:北京、上海、廣州、深圳、江蘇、青島、山東、東北等全國各省市區均現貨銷售,送貨上門

 

植物維生素D(VD)ELISA試劑盒,Elisa價格,說明書 

該公司產品分類: 動物血漿 動物無菌脫纖維血 動物抗凝血 封閉專用血清 紅細胞 透析袋夾子 人ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 兔ELISA試劑盒 其它ELISA試劑盒 猴ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 鴨ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒

DM-P5517豬失調癥蛋白質1(ATXN1)酶聯免疫試劑盒

豬失調癥蛋白質1(ATXN1)酶聯免疫試劑盒

產品貨號:DM-P5517

產品規格:48/96T

概述:

ELISA(酶聯免疫吸附檢測)是一種平板檢測技術,旨在檢測和定量肽、蛋白質、抗體和激素等物質。其他名稱,比如酶 免疫測定(EIA)也用于描述該的技術。在 ELISA 中,抗原必須固定化到固體表面,然后與連接到酶的抗體混合。通過 與適當的底物孵育,測量報告基因酶的活性來產生可測量的產物,從而實現檢測。該檢測策略中的最關鍵元素是高度特 異性的抗體-抗原相互作用。

 7.jpg

ELISA試劑盒的特點有:

一、高效、靈敏、特異的抗體

二、節省實驗經費

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型

五、穩定的重復性和可靠性

 ELISA 試劑盒主要保證規格概述

規格 

描述

這些對您的好處是?

標準品校準

校準符合國家生物標準和控制研究所 (NIBSC) 標準 (如可用)

可在多個平臺上實現準確定量和一致的參考標準

精度

板間 CV <10%<10% 的平均板內 CV

獲得一致的結果

稀釋線性度

檢測范圍內的線性結果

可準確定量連續稀釋樣品

平行性

重組蛋白標準品模擬天然蛋白

可靠地檢測樣品

回收率

緩沖液經過優化,可最大限度減少基質效應

有助于確保對血清和血漿等復雜基質內的樣品進行準確定量分析

靈敏度

針對特定檢測類型檢測相關水平的蛋白

實現低水平蛋白檢測

特異性

使用類似分析物進行交叉反應性測試

幫助確保準確測量目標蛋白質

批次間一致性

對內部控制進行測試,以評估數據是否在設定范圍內

有助于確保新批次獲得一致的結果

 

檢測內精度

檢測內驗證顯示檢測板內孔間的重現性。檢測內驗證產生的數據有助于確保在板的不同孔中檢測的樣品給出可比較結果。以下是為具有代表性的板內驗證實驗生成和報告的數據示例。在本示例中, 通過在同一檢測中檢測三個樣品各重復 14 次來評估 Invitrogen VCAM-1 人 ELISA 試劑盒。每個樣品的 %CV 表明該檢測具有良好的重現性。具有已知 Hu sVCAM-1 濃度的樣品重復檢測14 次,以確定檢測的精度。

參數

樣品 1

樣品 2

樣品 3

平均值(ng/mL)

1.23

4.33

18.59

標準差

0.06

0.33

1.43

變異系數 (%CV)

4.85

7.62

7.68

檢測間精度

檢測間精度顯示不同日期進行的檢測間重現性。檢測間精度通常為< 10%。這確保獲得的結果隨著時間的推移和試劑盒之間保持一致。以下是為檢測間精度生成和報告的典型數據示例。在該示例中, 使用 Invitrogen 淀粉樣蛋白 β 42 人 ELISA 試劑盒在多天內檢測三份樣品,共檢測 36 次。結果顯示變異系數小于 10%,從而證明了檢測間良好再現性。

參數

樣品 1

樣品 2

樣品 3

平均值(ng/mL)

71.30

40.16

21.29

標準差

5.24

3.96

1.13

Coefficient of Variation (% CV)

7.36

9.85

5.32

稀釋線性度

線性是相對于基于標準曲線的分析物計算量來定義。樣品中分析物的最終計算濃度應與檢測定量范圍內的任何稀釋濃度相同。開發完善的免疫檢測試劑盒可最大限度地減少不同樣品基質和其他可能干擾的因素的潛在影響。稀釋線性驗證實驗提供了關于在不同稀釋水平下測試的樣品結果精度的信息。對每種經驗證樣品類型進行稀釋線性測試,如果結果是每種稀釋預期濃度的 70%-130%,則視為良好。線性對于在測定的動態范圍內準確測量分析物濃度非常重要,可使用公式計算:

% 線性度 = (稀釋后測量濃度 / 預期濃度) x 100

特定樣品類型的稀釋線性度通常如下表所示。在該示例中, 使用 HeLa 細胞裂解物評價 Invitrogen c-Myc (總) 人 ELISA 試劑盒。在檢測的動態范圍內,用試劑盒隨附的標準稀釋緩沖液稀釋 HeLa 細胞裂解物。測量值與預期值顯示出良好的檢測線性,并且沒有來自樣品基質的明顯干擾。

HeLa 細胞在 37°C 下,含有 10% 胎牛血清 (FBS) 的 DMEM 中生長,并用 細胞提取緩沖液裂解,并進行超聲處理。將該裂解物在標準稀釋緩沖液中稀釋至檢測范圍,并測量 c-Myc(總量)。檢測結果與預期濃度的線性回歸檢測產生的相關系數為0.99。

細胞裂解物

稀釋

測量值(pg/mL)

預期值(pg/mL)

% 線性

1/10

372.3

372.3

100

1/20

205.7

186.14

111

1/40

117.2

93.1

126

1/80

56.0

46.54

120

1/160

25.8

23.3

111

1/320

8.8

11.6

76

ELISA 回收率

回收率用于確定分析物檢測是否受樣品基質差異的影響;|(如血清和血漿)可能具有干擾因素,影響 ELISA 準確定量分析物的能力。

通過將已知量的分析物加標到不同樣品基質中來驗證回收率。進行檢測并確定回收率。通常,如果平均回收率為 80%-120%,則認為樣品基質對檢測準確定量分析物的能力影響最小。 

右表是用于報告回收率的典型格式。在該示例中,   檢測了 Invitrogen 脂聯素人 ELISA 試劑盒在 5 份不同血漿樣品中的回收率。 

樣品編號

平均回收率 (%)

1

99.6

2

99.8

3

100.2

4

92.5

5

91.8

 

ELISA 靈敏度

靈敏度定義為可與背景區分的最低分析物水平。這通常稱為分析靈敏度或檢測限。通過將零標準重復獲得的平均 O.D. 加上 2 個標準偏差來確定靈敏度。

例如, Invitrogen Tau (磷酸化) [pT181] 人 ELISA KI 靈敏度 <為 10 pg/mL。這表明測試的每個試劑盒批次的靈敏度均低于 10pg/mL。用于報告 ELISA 測定靈敏度的典型規格是 " 人 Tau [pT181] <的最低檢測濃度為 10 pg/mL。這通過零標準檢測 64 次時獲得的平均 O.D. 加上兩個標準偏差來確定。

ELISA 特異性

進行特異性測試以驗證檢測到的目標分析物與其他密切相關的分子未發生交叉反應。交叉反應可能導致假陽性結果或不準確定量。為了確保僅識別所需的分析物,對一組其他物質進行交叉反應性測試。

例如, 通過篩選 20 種不同物質的交叉反應性,對 Invitrogen IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒的特異性進行了檢測。用于報告 ELISA 特異性結果的典型格式是 " 使用 IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒檢測了一組 10 , 000 pg/mL 的物質的緩沖溶液。 1β γ 檢測后發現無交叉反應性:小鼠 IL-1 β , IL-2 , IL-4 , IL-10 , IFN- β , TNF- α ;大鼠 1β IL-1 β , IL-2 , IL-4 , IL-6 , IFN- γ , TNF- α ;人 IL-2 , IL-4 , IL-6 , IL-10 , IL-12 , IFN- γ , TNF- α ;豬 IL-8

ELISA 質量控制

ELISA 的生產過程涉及高質量生產標準,以確保高質量 ELISA 試劑盒的一致生產;疽蛩匕ā獓栏竦奈臋n和記錄保存,人員培訓,質量控制程序,設施和設備維護,關鍵流程的驗證,原材料控制,可追溯性,環境監測,變更控制, 和符合監管標準。 

 

 

ELISA 移液和洗滌技術技巧移液技巧

1. 使用符合制造商建議范圍內的正確移液器

2. 確認吸頭已牢固地插與移液器上

3. 確認移液時沒有氣泡

4. 在每個標準品,樣品或試劑之間更換吸頭

5. 每種試劑使用不同的儲液槽

6. 將樣品吸取到孔的側面,避免飛濺

7. 始終進行樣品 / 標準品復孔設置

洗滌流程

1. 通過將吸頭輕輕地降低到每個孔底部,完全吸液所有孔中的液體。    備注:小心操作,不要劃傷孔內側。

2. 用至少 400 μ L ?L 的洗滌緩沖液填充孔

3. 浸泡 15 到 30 秒

4. 從孔中吸出洗滌緩沖液

5. 按照提示重復方案 (通常 3-4 次)

6. 清洗完成后,翻轉孔板并在吸水組織上輕敲 (必要時用力) 干燥。確保清除所有殘留的液體。

7. 或者,也可使用洗瓶或自動洗板機。請務必 遵循上述內容。

 

實驗步驟

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果,每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。

 

注意事項劑盒的儲存

1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。

2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。

 

須知:

試劑盒內酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在驗后1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內所有組分都確保是穩定的。

 

DUMABIO ELISA檢測試劑盒

公司與各大高校、醫院及權威科研單位保持著良好的合作關系,公司的產品質量及服務態度得到了他們的一致認可。篤瑪生物本著客戶至上的原則為客戶提供優質產品,公司產品有任何質量的問題免費包退換(非人為因素造成的)。公司提供免費代測服務,并且收到樣本七個工作日出結果,確保數據的準確性。

上海篤瑪生物科技有限公司

該公司產品分類: OmnimAbs 試劑盒 代理品牌 實驗外包 重組細胞因子 標準品 抗體 培養基 生化試劑 酶類 血清 ELISA試劑盒

人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態 阿儀網

人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態 阿儀網 IGF-2 ELISA Kit  96T/48T

人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態 阿儀網

試劑盒產品說明:IGFBP(胰島素樣生長因子結合蛋)胰島素樣生長因子結合蛋白是一組能夠和胰島素樣生長因子(IGF)以高親和力結合的可溶性蛋白,綜們不僅攜帶IGF,延長IGF的半衰期,而且還調控IGF的生物活性,影響IGF的分布IGFBP。血清中的IGFBP23的濃度受雌激素、甲狀旁腺激素( PTH) 、糖皮質激素等調控,其中生長激素(GH)IGFBP23 的主要調控因子。根據對肝、腎等組織的研究,在體外IGFBP23 的表達可由IL21、TNF2αTGF2β、維A酸、骨源性蛋白21、雌二醇、前列腺素E2、糖皮質激素和p53等調控。公司ELISA試劑盒優點介紹:

更靈敏、特異性好、重復性強、更環保、經濟實惠、實驗效果穩定

產品種屬介紹:蝌蚪、駱駝、海馬、蝸牛、馬、大象、鴿子、類人猿、熊貓、貂、大鼠、小鼠、牛等動植物

人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態 阿儀網產品包裝介紹:液體長方體盒裝

產品保存介紹:恒溫四度(專家建議)

肌肌酸激酶(CKM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T JW-E307 Homo sapiens (Human)

核糖核酸酶T2(RNASET2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2) 48T/96T JW-E308 Homo sapiens (Human)

N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 48T/96T JW-E309 Homo sapiens (Human)

激活素AB(ACVAB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin AB (ACVAB) 48T/96T JW-E310 Homo sapiens (Human)

α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 48T/96T JW-E311 Homo sapiens (Human)

泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T JW-E312 Homo sapiens (Human)

半乳糖苷酶β(GLβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb) 48T/96T JW-E313 Homo sapiens (Human)

脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I Like Protein 2 (DNASE1L2) 48T/96T JW-E314 Homo sapiens (Human)

谷丙轉氨酶(ALT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T JW-E315 Mus musculus (Mouse)

丙酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T JW-E316 Homo sapiens (Human)

補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 48T/96T JW-E317 Homo sapiens (Human)

補體成分3a受體1(C3aR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 3a Receptor 1 (C3aR1) 48T/96T JW-E318 Homo sapiens (Human)

前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prostaglandin F Receptor (FP) 48T/96T JW-E319 Homo sapiens (Human)

α-黑色素細胞刺激素(αMSH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH) 48T/96T JW-E320 Homo sapiens (Human)

雄烯二醇(AED)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Androstenediol (AED) 48T/96T JW-E321 General

對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1) 48T/96T JW-E322 Homo sapiens (Human)

胱天蛋白酶2(CASP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 2 (CASP2) 48T/96T JW-E323 Homo sapiens (Human)

著絲粒蛋白E(CENPE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centromere Protein E (CENPE) 48T/96T JW-E324 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒Homo sapiens (Human)

甘膽酸(CG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholyglycine (CG) 48T/96T JW-E325 Homo sapiens (Human)

肝素輔因子Ⅱ(HC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII) 48T/96T JW-E326 Homo sapiens (Human)

公司提醒:為了您獲得更理想的人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒實驗結果,請精確配制標準品及工作液AB,以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;酶標板在溫育時應加膜覆蓋以避免液體蒸發;檢測液A和檢測液B,以及底物溶液在使用前,應置于37℃溫育30分鐘待用;洗板后應盡快進行下一步操作,避免酶標板長時間處于干燥狀態。     

 

該公司產品分類: 細胞詳情頁 比色法定量檢測試劑盒 熒光素標記抗體 免疫血清抗血清 免疫球蛋白抗原IgG 酶標記親和素及生物素化抗體 酶標記抗體 純化抗體IgG 人血清 免疫抗原抗體 動物血清 蛋白純化試劑盒 sigma抗體 其它ELISA試劑盒 猴類ELISA試劑盒 細胞 中檢所標準品 化學標準品 標準溶液 中藥標準品

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elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物elisa試劑盒上海潤裕生物科技有限公司專業供應各種elisa試劑盒產品,主要包括:人、大小鼠、兔、、猴、豬、豚鼠elisa試劑盒等種屬elisa試劑盒。如果您對我司其他產品感興趣可通過以下方式咨詢訂購,elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物各種系列elisa試劑盒。購買本公司任何一種elisa試劑盒,都可提供代檢測服務,現貨直銷,質量有保障,款到當天可發貨,免費快遞送貨上門,詳情可咨詢我公司客服。

規格96T/48T

存儲條件:2-8℃ 避光儲存

有效期:6個月(可接受預定)

待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。

檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠elisa檢測試劑盒等種屬。

適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床

elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物方法類型和操作步驟:

  elisa可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。

(一)雙抗體夾心法

  雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:

  (1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。

  (2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。

  (3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。

 。4)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。

  根據同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。

(二)間接法測抗體

  間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:

  (1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。

  (2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。

  (3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。

 。4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。

  本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。

(三)競爭法

  競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下:

 。1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。

  (2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會,使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫后,酶標抗原與固相抗體的結合可達最充分的量。洗滌。   (3)加底物顯色:參考管中由于結合的酶標抗原最多,故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。

凡購買elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物等相關elisa試劑盒產品,我司擁有一流的技術團隊,完善的售后服務體系。公心語生物公司提供免費代測,需要代測單位的試驗材料和試劑等均須采用特快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運輸,以確保實驗物品的安全可靠。如數量巨大,我司可以讓專業人員前往提取。詳情請與我司銷售人員聯系。

該公司產品分類: 豬elisa試劑盒 植物elisa試劑盒 魚elisa試劑盒 羊elisa試劑盒 鴨elisa試劑盒 豚鼠elisa試劑盒 兔elisa試劑盒 犬elisa試劑盒 其他elisa試劑盒 牛elisa試劑盒 雞elisa試劑盒 猴elisa試劑盒 小鼠elisa試劑盒 大鼠elisa試劑盒 人elisa試劑盒 elisa試劑盒

人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒說明書

一:人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒產品參數
編號 中文名稱 英文名稱 規格
F2304-A 人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒  Human Angiopoietin 1,ANG-1 elisa Kit 48T
二:人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒操作方法

人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明

1、人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。  

2、人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點,已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。  

3、臨床標本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現:生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內采取數份血樣本,以其中間值為測定值。又如當從臥位變為站立位時,血清中腎素活性將出現明顯增高。再如治療藥物的檢測,應根據藥代動力學選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。

(1)要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。(5)標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。 

4、試劑準備 在臨床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備最為關鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。

三、加血清樣本及反應試劑

在現在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。試劑的加入在國產試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現重復滴加或加在兩孔之間的現象,這樣就會在孔內的非包被區出現非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

四、溫育

溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現問題的步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內質控中,測定由衛生部臨床檢驗中心供應的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可。

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